胶体金标记蛋白实验现象及结论

       实验现象：对照管（未加蛋白质）和加入蛋白质的量不足以稳定胶体金的各管，均呈

现出由红变蓝的聚沉现象；而加入蛋白量达到或超过最低稳定量的各管仍保持红色不变。

以稳定1ml胶体金溶液红色不变的最低蛋白质用量，即为该标记蛋白质的最低用量，在实

际工作中，可适当增加10％～20％。将待标记的蛋白质储存液作系列稀释后，分别取

0.1ml(含蛋白质5～40ug)加到1ml胶体金溶液中，另设一管不加蛋白质的对照管，５分

钟后加入0.1ml 10％NaCl溶液，混匀后静置２小时，不稳定的金溶胶将发生聚沉，能使

胶体金稳定的最适蛋白量再加10％即为最佳标记蛋白量。

       胶体金标记的全定量免疫层析技术的原理：样品加入样品吸收垫，样品中的液体首先

溶解胶体金垫中含有的胶体金标记的鼠源性单克隆抗体。其次样品中待测抗原与胶体金颗

粒标记的鼠源性单克隆抗体结合，形成抗原-抗体*胶体金复合物，并靠毛细作用向检测线

移动。在硝酸纤维薄膜的检测线上固定有另一鼠源性单克隆二抗。当样品层析至检测线时，

可以进一步形成抗体-抗原-抗体*胶体金双抗体夹心复合物，并在检测线上聚积显现出一条

可见的显色反应。无显色反应则表示样品中无抗原存在。而胶体金的量反应了待测抗原的

量。从加样垫中泳动过来的过量胶体金标记的单克隆抗体是鼠源性的，无论携带抗原与否，

均可被固定于标准的羊抗鼠抗体所捕获，形成显色反应，这种显色反应，既代表了整个反

应体系是正确的，同时C1、C2区的显色反应的深浅，与检测区中测抗原的量呈对应关系。

胶体金颗粒在特定波长下，对光的吸收和散射与胶体金颗粒的量相关，通过光电感应器检

测胶体金颗粒对光的吸收和散射，从而获得待测抗原的量。

--------------------------------------------------------

作者：克里斯GYD

链接：https://wenku.baidu.com/view/708cd39287868762caaedd3383c4bb4cf6ecb741

来源：百度文库